تبلیغات
مواد شیمیایی و تجهیزات آزمایشگاهی
گیره بالون
مواد شیمیایی
مواد آزمایشگاهی
 
 
 
Merck ، Scharlau ، Sigma-Aldrich ، Panreac ، Riedel ، Applichem ، Fluka ، CDH ، SD Fine ، DAEJUNG ، DUKSAN ، PARS CHEMIE

کروماتوگرافی

نویسنده : Ha med | تاریخ : 06:11 ب.ظ - چهارشنبه 19 تیر 1392

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (High Efficiency Liquid Chromatography)(HPLC)

 کروماتوگرافی مایع با فشار زیاد HPLC

می دانیم كه كروماتوگرافی روشی است برای شناسائی و جدا سازی و اندازه گیری مواد. HPLC یعنی كروماتوگرافی مایع با فشار زیاد یا كروماتوگرافی مایع با كاركرد عالی است. HPLC از دو فاز ثابت و متحرک تشكیل شده است. كه فاز ثابت ممكن است جامد و یا مایع باشد و فاز متحرک مایع است. HPLCبدون شک ، سریع‌ترین رشد را در بین تمام روش‌های جداسازی تجزیه‌ای با فروش سالیانه در گستره بیلیون دلار داشته است. دلایل این رشد انفجارآمیز عبارتند از حساسیت روش ، سازگاری سریع آن برای انجام اندازه‌گیری‌های کمی صحیح ، شایستگی آن برای جداسازی مواد گونه‌های غیرفرار یا ناپایدار در مقابل گرما و مهم‌ تر از همه ، کاربرد گسترده آن برای موادی است که در صنعت ، زمینه‌های مختلف علوم و جامعه اهمیت درجه اول را دارند. مزیت کروماتوگرافی نسبت به ستون تقطیر این است که به آسانی می‌توان به آن دست یافت. با وجود اینکه ممکن است چندین روز طول بکشد تا یک ستون تقطیر به حداکثر بازده خود برسد، ولی یک جداسازی کروماتوگرافی می‌تواند در عرض چند دقیقه یا چند ساعت انجام گیرد.یکی دیگر از مزایای برجستة روشهای کروماتوگرافی این است که آنها آرام هستند. به این معنی که احتمال تجزیة مواد جداشونده به وسیله این روش‌ها در مقایسه با سایر روش‌ها کمتر است.مزیت دیگر روش‌های کروماتوگرافی این است که تنها مقدار بسیار کمی از مخلوط برای تجزیه لازم است. به این علت، روشهای تجزیه‌ای مربوط به جداسازی کروماتوگرافی می‌توانند در مقیاس میکرو و نیمه میکرو انجام گیرند.

انتخاب بهترین روش کروماتوگرافی

انتخاب نوع روش کروماتوگرافی بجز در موارد واضح (مانند کروماتوگرافی گازی در جداسازی گازها) عموماً تجربی است. زیرا هنوز هیچ راهی برای پیش‌بینی بهترین روش برای جداسازی اجسام، مگر در چند مورد ساده وجود ندارد.

در ابتدا روش‌های ساده‌تری مانند کروماتوگرافی کاغذی و لایه نازک امتحان می‌شوند. در صورتی که با این روشها مستقیماً قادر به جداسازی باشند، جداسازی را باید به وسیلة آنها صورت داد. در غیر این صورت، از روش‌های پیچیده‌تر استفاده می‌شود.

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)، وقتی که روش‌های ساده فاقد کارایی لازم هستند، می‌تواند جوابگو باشد. ولی دانشمندان دریافتند که بهترین نوع به خاطر دقیق تر بودن کروماتوگرافی ژلی است.

کارایی ستون HPLC

کار این ستون نیز به اندازه ذرات داخل ستون بستگی دارد. هرچه اندازه ذرات کوچک‌ تر باشد، کاراییHPLC بیشتر می‌شود.

فاز ساکن و فاز متحرک

در مورد فاز‌های ساکن و متحرک یک قاعده کلی وجود دارد و آن ، این است که باید قطبیت حل‌ شونده و فاز متحرک ، نزدیک به هم باشد، ولی با فاز ساکن اختلاف داشته باشد. ترتیب قطبیت گروه‌های عاملی در ترکیبات به صورت زیر است:

هیدروکربن< اترها < استرها < کتون‌ها < آلدئیدها < آمیدها < آمین‌ها < الکل‌ها

به عنوان مثال ، فاز ساکن با قطبیت بالا مثل سیلیکات یا آلومین یا مایعات قطبی مثل تری‌اتیلن گلیگول که روی ذرات سیلیکات قرار گرفته‌اند و فاز متحرک ، حلال نسبتا غیر قطبی مثل هگزان یا ایزو پروپیل اتر را می‌توان نام برد.


خصوصیات فاز متحرک ( HPLC )

  • خلوص بالا
  • نقطه جوش حدود 20 تا 50 بالاتر از دمای ستون
  • گرانروی پایین
  • واکنش پذیری کم
  • قابلیت تطابق با آشکارساز
  • سمیت و اشتعال پذیری کم


مزایای HPLC

کاربرد HPLC برای مواد غیر فرار به قرار زیر می‌باشد:
از ستون‌های طولانی که سرعت حلال در تمام طول آنها نزدیک به مطلوب‌ترین سرعت باشد، می‌توان استفاده کرد و امکان تغییر دادن ماهیت فاز متحرک برای انجام شستشوی تدریجی و شستشوی مرحله‌ای یا هر دو وجود دارد.

آشکارساز

آشکارسازهای مورد استفاده در کروماتوگرافی مایع - مایع تمام خصوصیات آشکارسازهای کروماتوگرافی گازی را دارند، بجز اینکه در آشکارساز کروماتوگرافی مایع نیازی به محدوده دمایی بالا نیست. این شناساگرها کلاً دو دسته‌اند:

  • یک نوع کلی که به فاز متحرک عکس‌العمل نشان می‌دهند.
  • نوع خاصی که به حل شونده حساس هستند.


کاربردهای HPLC

کاربرد گسترده آن برای موادی است که در صنعت ، زمینه‌های مختلف علوم و جامعه اهمیت درجه اول را دارند. مثال‌هایی از این موارد عبارت‌اند از : اسیدهای آمینه ، پروتئین‌ها ، اسیدهای نوکلئیک ، هیدروکربنها ، هیدراتهای کربن ، داروها ، ترپنوئیدها، حشره‌کش‌ها ، آنتی‌بیوتیکها ، استروئیدها ، گونه‌های آلی یا فلزی و گروهی از مواد گوناگون معدنی.

در دستگاه HPLC سیستم پیچیده تری نسبت به دیگر روشهای کروماتوگرافی وجود دارد. اغلب ازستون‌های پر شده با ذرات ریز فاز ساکن استفاده می‌شود. به همین علت سطح بیشتری از فاز ساکن در ستون، در معرض اجزاء نمونه قرار می‌گیرد و در نتیجه راندمان جداسازی در این روش بیشتر از LSC  وLLC است.

 

اجزاء و قسمتهای مختلف دستگاه HPLC

1- مخازن حلال: كه در آنها فاز متحرک و یا حلالهای شستشو دهنده ستون ریخته شده است.

2- موتور یا پمپ: چون ستونها نسبتا طویل و اندازه ذرات كم است. به این جهت قابلیت نفوذ كم می شود و برای این كه حلال جریان داشته باشد باید فشاروجود داشته باشد. برای ایجاد فشار از پمپ یا موتور استفاده می كنیم. پمپ فشاری حدود psi 4500 می تواند ایجاد كند. و باید بتواند فشار ثابت ایجاد كند. حلال توسط پمپ با فلوی ثابتی بر روی فاز ثابت حركت داده می شود. حداكثر فلوئی كه فاز متحرک می تواند داشته باشدml/min 2.5 است. و بسته به نوع كاری كه می خواهیم انجام دهیم فلو فرق می كند، هر چه فلو كمتر باشد، فاصله پیک ها بیشتر است. چهارمخزن داریم مخزنD, C, B, A میزان فشار بستگی به فلوی ما دارد وقتی فلو ml/min 0.8 است میزان فشار حدود psi 1500 می شود. میزان فشار بستگی به نوع ستون دارد حداكثر فشار مجاز Psi 3500 است. حداكثر تغییرات فشار Psi 100 است. حداكثر فلوریت Flow rate ، ml/min 2.5 است. پس پمپ، حلال را از مخزن می گیرد و با سرعت گذر ثابتی آن را بداخل دستگاه وارد می كند. در دمای آزمایشگاه به دو روش می توانیم كار كنیم:

الف- روش ایزوكراتیک isocratic: اگر نسبت های مختلفی از فاز متحرک را در یک مخزن بریزیم و از همان  مخزن فاز متحرک را برداشت كنیم از روش ایزوكراتیک استفاده كرده ایم. مثلا در کار عملی انجام شده درآزمایشگاه فاز متحرك( 80% بافر فسفات 12%  متانول و 8% استونیتریل) است كه پس از صاف كردن همه را در یک مخزن مثل D می ریزیم و از همان مخزن پمپ برداشت  می كند.

ب - روش گرادیانت gradient :اجزاء فاز متحرک در مخازن مختلف ریخته می شود. دستگاه قابلیت این را دارد كه خودش نسبت های مختلف را از مخازن برداشت كند (طبق داده های ما)، مثلا می خواهیم ازمخزنA، 80% از مخزن B 8% و از مخزن C 12% بكشد. و بعد نسبت ها را مخلوط می كند. از این روش وقتی استفاده می كنیم كه نسبت های موردنظر را نمی دانیم و بخواهیم روش کار پیدا كنیم. ولی وقتی درصد فاز متحرک برای ما روشن شد می توانیم از روش ایزوكراتیک استفاده كنیم. فاز متحرک با فلوی ثابتی بر روی ستون حركت داده می شود حداكثر فلو در این آزمایش ml/min0.8 یا 1 است. بعد از فعال كردن هر پمپ flow rate را از كم به زیاد كم كم بالا می بریم تا حدود ml/min  0.8 یا 1 و می گذاریم حدود یک ربع ساعت یا نیم ساعت با فلوریت بالا كار كند و بعد فلوریت را به تدریج پایین می آوریم تا صفر و بعد پمپ را عوض می كنیم. یا دستگاه را خاموش می كنیم، فلوریت كه بالا برود فشار هم بالا می رود. بعد از اتمام كار ستون را با حلالهای شستشو دهنده می شوئیم.  حلالهای شستشو را در مخازن ریخته و پمپ ها را به ترتیب فعال می كنیم اول دستگاه را با آب و متانول شسته و سپس با متانول خالص می شوئیم. هر پمپ را كه فعال كردیم باید ابتدا هوا گیری کنیم.

تهیه بافرفسفات: 13.6 گرم از Po4H2K را وزن كرده (0.1M) و به حجم یک لیتر می رسانیم pH ،4.5 می شود كه با اسید فسفریک غلیظ حدود یک دو قطره pH را به حدود 3.5 می رسانیم.

 

3- injector: از سرنگهای مختلف با ظرفیت های مختلف استفاده می كنیم. حجم تزریق 30 میكرولیتر است. نمونه ابتدا وارد قسمتی بنام گارد كالوم یا پری كالوم می شود كه محافظ ستون است، طول كاردكالوم حدو یک سانتی متر است. و جنس آن از فولاد ضد زنگ است، و ماده پركننده آن از جنس ماده پركننده ستون است. اگر ماده ما ناخالصی داشته باشد یا با ماده داخل ستون واكنش ایجاد كند درگاردكالوم انجام می شود و به ستون آسیبی نمی رسد.

 

4- ستون: طول ستونهای دستگاه حدود 30-10 سانتی متر است. و جنس آن از فولاد ضدزنگ است. پرمصرف ترین ستون C18 ، ODS آکتا دسیل سیلان است، ستونها را پس از اتمام كار باید با محلولهای شستشو دهنده شست. اگر از بافرفسفات استفاده كردیم ستون را با آب و متانول و بعد با متانول خالص شستشو می دهیم. فاز ثابت بصورت ذرات ریزی در داخل ستون قرار گرفته است. كه بر اثر چسبیدن و پخش شدن اجزاء نمونه و عبور فاز متحرک جداسازی انجام می شود. نمونه ابتدا وارد گاردكالوم و بعد وارد ستون می شود، گارد كالوم را پس از مدتی باید عوض كرد، ODS اكتا دسیل سیلان گروههای الكیل غیرقطبی زیادی دارد، فاز متحركی كه استفاده   می كنیم قطبی است. فاز متحرک و ماده پركننده ستون از نظر قطبیت باید عكس هم باشند. در HPLC امکان استفاده از فاز نرمال و معكوس هست. اگر فاز ثابت قطبی و فاز متحرک غیرقطبی باشد سیستم را فاز نرمال و در صورتی كه ستون غیرقطبی و حلال قطبی باشد. سیستم را فاز معكوس می گویند. مشتقات آلكیل سیلان و فنیل سیلان ایجاد ستونهای غیر قطبی می كنند و معمولا ستون غیر قطبی و فاز متحرک قطبی است بنابراین از فاز معكوس استفاده می شود. جنس ستونها از فولاد ضدزنگ یا Stainless steel است.

 

5- ردیابها: ردیابها باید حساس باشند و اثر مخرب بر روی اجسام نداشته باشند. پاسخ آنها تا حدود وسیعی برای غلظت باید خطی باشد. 


انواع رد یاب ها:

A- مهمترین آنها ردیاب ماورا بنفش است که برای اجسامی كه در ناحیه UV-VIS جذب داشته باشند مورد استفاده قرار می گیرد.در این دتكتور جذب انجام می شود و باعث كاسته شدن انرژی می شود كه این كاسته شدن قابل اندازه گیری است.میزان كاسته شدن انرژی متناسب است با غلظت،باید طول موج را مشخص كنیم كه در اینجاnm  l=225 است. حلال نباید در طول موج انتخابی جذب داشته باشد.

B- ردیاب ضریب شكست، این ردیاب خیلی حساس به حرارت است.از تغییرات یا تفاوتی كه بین ضریب شكست سیستم حلال به تنهایی و سیستم حلال همراه نمونه ایجاد می شود استفاده می كنیم.

C- دتكتور فلورسانس حساس تر از UV است ولی كم مصرف می باشد چون موادی كه خاصیت فلورسانس داشته باشند كم هستند.

D-.ردیاب الكتروشیمیایی كه عملکرد آن بر مبنای واکنش های اکسید و احیا می باشد.

 

6- ثبات (ركوردر): در اثر حركات قلم پیک هایی رسم می شود كه به  مجموعه آنها كروماتوگرام می گویند. به طریق كیفی پیک ها را براساس زمان باز داری یا نگهداری یا Retention time می شناسند. زمان بازداری فاصله زمانی از لحظه تزریق تا رسیدن به نقطه اوج یک پیک است. برای محاسبه كمی سطح هر نوار جذبی را حساب می كنیم، سطح هر نوار جذبی متناسب با مقدار جسم است كه بوسیله انتگراتور یا سطح سنج با دستگاه ثبات بدست می آید سطح هر نوار جذبی یعنی حاصلضرب قاعده × نصف ارتفاع است. روش بریدن نوار و وزن كردن آنها روش قدیمی است. ولی امروزه توسط سطح سنج یا انتگراتور بدست می آید خود دستگاه AUC را مشخص می كند. می توان از ارتفاع هم استفاده كرد و نسبت ارتفاع ها را مشخص كنیم AUC و ارتفاع با یک دستور ساده قابل تبدیل بهم هستند. روش رسم منحنی را انجام می دهیم. در محور افقی غلظت ها و در محور عمودی AUC . بعد از رسم منحنی استاندارد، غلظت مجهول را از روی رسم منحنی بدست می آوریم.

 

تفاوت HPLC با GC:

1- چون اغلب مواد آلی ناپایدار و كم فرار هستند. برای كار با GC باید آنها را به مشتقات فرار تبدیل كرد كه ایجاد مشتقات فرار و باقی ماندن جزیی از مصرف مشتق ساز ایجاد پیک هایی می كند كه نتایج آزمایش را مختل می سازد حال آنكه جداسازی این گونه مواد با HPLC به آسانی امكان پذیر است.

2- دو فاز ثابت و متحرک در HPLC بطور رقابتی عمل می كنند و جداسازی بوسیله دو فاز انجام می شود در صورتی كه در GC یک فاز یعنی فاز ثابت عمل جداسازی را انجام می دهد.

3- یكی از مزایای HPLC وجود دتكتورهای آنست كه برای هر دسته از تركیبات دتكتورهای انتخابی ویژه وجود دارد كه این تنوع دتكتورها از مزایای HPLC است. در صورتی كه در GC دتكتور ها محدود تر می باشد.

4- مدت آنالیز در HPLC فوق العاده اندک است، آنالیز تركیبات آلی ناپایدار و كم فرار مواد خوراكی، شیمیایی داروئی توسط HPLC امكان پذیر است.

5- مواد بسیار قطبی را با GC نمی توان آنالیز كرد در صورتی كه با HPLC می شود.

6- درHPLCبه سبب دو فاز رقابتی پیک ها معمولا بصورت متقارن هستند در صورتی كه درGC اغلب پیک ها بصورت نامتقارن هستند و محاسبه مساحت زیر منحنی یا AUC با اشكال و خطا است. ولی در HPLCبعلت وجود تقارن محاسبه AUC دقیق انجام می شود.

7-وجود آب در نمونه های آزمایش در HPLC اشكال ایجاد نمی كند در صورتی كه در GC وجود اندک آب سبب تخریب دتكتور می شود.

8- وجود آب در شبكه كریستالی، وجود مولكولهای آب هیدروژن در HPLC قابل تشخیص ولی در GC قابل ارزیابی نیست.

9-وجود ناخالص ها بخصوص ناخالصی های بسیار قطبی و یا با وزن مولكولی بالا در HPLC قابل تشخیص ولی در GC قابل تشخیص نیست.

                                           مقایسه حوزه كاركرد، محدودیت ها و امتیازات سیستم GC و HPLC

                                              GC

                                   HPLC

1-تركیبات آلی بسیار ناپایدار را نمی توان مستقیما مورد آنالیز قرار داد و باید توسط معرفهای خاصی، از نظر شیمیائی آنها را بصورت تركیبات مناسب برای آنالیز باGC در آورد. این معرفها را تركیبات مشتق ساز می گویند.

2-تركیبات آلی با فراریت اندک را نمی توان مستقیما آنالیز كرد و باید توسط عوامل مشتق ساز آنها را به تركیبات مناسب تبدیل نمود.

3-آنالیز مواد داروئی، خوراكی، صنایع سنگین (مثل پلیمرها) و مواد شیمی حیاتی به سادگی امكان پذیر بوده و مستلزم برنامه بندیهایی با شرایط دشوار و پیچیده است.در هر صورت بهره دهی GC در موارد مزبور چندان رضایت بخش نیست.

4-اغلب آنالیزهای GC نیازمند دماهای زیاد است كه كنترل مقدار دمای اپتیمم پارامتر مشكلی بوده و اغلب منجر به ایجاد پیكهای نامتقارن می شود.

5-در سیستم GC فاز ثابت و فاز متحرک با مكانیسم رقابتی همسان عمل نمی كنند و عمدتا یک فاز (فاز ثابت) موجب جداسازی می گردد. در قیاس با عملكرد رقابتی دو فاز (ثابت و متحرک) HPLC، افت شدیدی در كم و كیف آنالیز ایجاد می شود.

6-تركیبات متعددی از گونه های مختلف وجود دارند كه سیستم GC قادر به آنالیز آنها نیست.

7-در GC بیشتر سه نوع دتكتور ECD, FID وTCD به كار گرفته می شود و برای دسته تركیبات خاص دتكتورهای ویژه ای ابداع نشده است. این امر یكی از محدودیت های بزرگ GC در مقایسه با HPLCاست.

8-به كارگیری GC و دست یابی به شرایط لازم و مناسب، دشوار و پیچیده است.

9-آنالیز كمی اجسام در قیاس با HPLC از حساسیت و دقت كمتری برخوردار است.

10-مواد بسیار قطبی را نمی توان مستقیما تحت آنالیز قرار داد.

11-روند مشتق سازی برای تبدیل مواد آزمایشی به تركیبات مناسب برای آنالیز، با مشكلات عدیده ای مواجه است.

12-باقی ماندن مقادیر بسیار اندک عوامل مشتق ساز موجب پیدایش پیكهای ناخواسته می گردد كه در نهایت استنتاج پیكهای حاصل از نمونه آزمایشی را دشوار نموده و یا حتی با پیكهای مزبور تداخل یافته و تفسیر كروماتوگرام را عملا ناممكن می نماید.

13-به سبب جذب مواد آزمایشی توسط فاز ثابت، اغلب پیكها بصورت نامتقارن ایجاد می شوند.

14-وجود ناخالصی های بسیار قطبی، در نمونه آزمایشی قابل تشخیص نیست.

15-وجود ناخالصی هایی با وزن ملكولی بسیار بالا قابل تشخیص نیست.

16-به سبب عدم مشخص شدن ناخالصی های بسیار قطبی و یا با وزن ملكولی بالا، لازم است كه پیش از كروماتوگرافی، توسط افزارهایی نظیر UV و IRخلوص مواد آزمایشی تحت بررسی قرار گیرد.

17-استناد پذیری قاطع یک پیک به یک جسم امكان پذیر نیست (بنا به دلایل بالا)

18-عدم وجود تقارن در پیكهای بدست آمده، محاسبه مساحت سطح زیر منحنی (AUC) را با اشكالات و خطاهای فراوان مواجه می كند و در نهایت دقت آنالیز مخدوش می شود.

19-وجود مقادیر بسیار اندک آب در نمونه های آزمایشی باعث تخریب دتكتور FID و ECD می گردد.

20-ملكولهای آب موجود در شبكه كریستالی اجسام توسط GC  قابل ارزیابی نیست.

21-ملكولهای آب واجد بند هیدروژنی قابل ارزیابی نیست.

22-افت چشم گیر كارایی و بهره دهی ستون های GCدر كاربردهای زیاد موردی معمولی است.

23-مدت زمان لازم برای آنالیز طولانی است.

24-كاربرد كروماتوگرافی فرآوری در مقیاس وسیع امكان پذیر نیست.

25-افت میزان آشكارسازی ستونها در بكارگیری زیاد آنها در GC موردی عادی و معمولی است.

26-عدم سهولت تجدید پذیری و دشواری خاص آن به لحاظ پارامترهای مختلف جزو محدودیت های سیستمGC است.

1-تركیبات آلی بسیار ناپایدار به سادگی تحت آنالیز قرارمیگیرند .

2-تركیبات آلی كه به طور كافی فرار نمی باشند به راحتی مورد آنالیز قرار می گیرند. 

3-آنالیز مواد داروئی، خوراكی، صنایع سنگین و مواد شیمی- حیاتی با بهره دهی و كارایی بسیار برجسته و چشم گیر انجام پذیرست.

4-آنالیزهای HPLC در دمای معمولی انجام پذیر بوده و یا نیازمند دماهای اندكی است.

5-در سیستم HPLC دو فاز ثابت و متحرک با مكانیسم رقابتی عمل می كنند كه در مقایسه با یک فاز موجود در GC (فاز ثابت) موجب انجام آنالیزهای دقیق می گردند.

6-تركیبات مختلفی كه آنالیز آنها توسط GC امكان ناپذیرست با HPLC به راحتی آنالیز می گردند.

7-در سیستم HPLC برای هر دسته تركیبات خاص، دتكتورهای انتخابی ویژه وجود دارد كه كم و كیف آنالیز را به بهترین وجه ممكن افزایش می دهند وجود این چنین دتكتورهای انتخابی، فراز عمده ای در سیستم HPLC محسوب می شود.

8-به كارگیری HPLC بسیار آسان است.

9-آنالیز كمی اجسام با حساسیت و دقت فوق العاده ای امكان پذیرست (به علت افزارمندی خاصHPLC)

10-مواد بسیار قطبی به راحتی تحت آنالیز قرار می گیرند.

11-به علت حوزه وسیع كارایی HPLC معمولا به روند مشتق سازی نیازی نیست.

12-به علت به كارگیری مواد آزمایشی بدان صورتی كه وجود دارند و نیز به سبب عدم نیاز به روند مشتق سازی و عدم وجود بقایای بسیار اندک عوامل مشتق ساز، استنتاج كروماتوگرام به راحتی انجام می گیرد.

13-به سبب وجود دو فاز رقابتی معمولا پیكها بصورت متقارن ایجاد می شوند.

14-وجود هرگونه ناخالصی با قطبیت های مختلف، قابل تشخیص است.

15-وجود ناخالصی هایی با وزن ملكولی بسیار بالا قابل تشخیص است.

16-به سبب مشخص شدن هرگونه ناخالصی نیازی به استفاده از افزارهای UV و IR جهت تعیین خلوص جسم وجود ندارد.

17-بنا به دلایل بالا استناد قطعی یک پیک به جسم خاصی امكان پذیرست.

18-به علت وجود تقارن در پیكها، محاسبه دقیق(AUC) و بالمال ارزیابی كمی بسیار دقیق آنها امكان پذیرست.

19-وجود آب در نمونه های آزمایشی اشكالی در كل آنالیز ایجاد نمی كند.

20-ملكولهای آب موجود در شبكه كریستالی اجسام قابل ارزیابی است.

21- ملكولهای آب واجد بند هیدروژنی قابل ارزیابی است.

22- كارایی ستونهای HPLC در بكارگیری های فراوان افت قابل توجهی نمی یابند.

23- مدت زمان لازم برای آنالیز بسیار اندک است.

24- كاربرد كروماتوگرافی فرآوری در مقیاسهای وسیع امكان پذیرست.

25-قدرت آشكارسازی بیشتر ستونها حتی در صورت به كارگیری بسیار زیاد آنها جزو امتیازات چشم گیر سیستم HPLC است.

26-سهولت تجدید پذیری (Reproducibility)در سیستم HPLC از فزارهای عمده این سیستم محسوب می شود.


نانوفناوری و کروماتوگرافی

کروماتوگرافی راهی است برای تشخیص اجزا در ابعاد نانومتری، با دقتی در حد و اندازه مولکولی و مدتها پیش از شکل گیری فناوری نانو، برای شناسایی مواد به کار می رفت. اگر چند مولکول با هم داشته باشیم، کروماتوگرافی تشخیص می دهد غلظت آنها چقدر است. اساس کار کروماتوگرافی جداسازی اجزای مخلوط با استفاده از سرعت متفاوت حرکت مولکولهای مختلف در محیط یکسان و با انرژی اولیه مشابه است. دستگاههای کروماتوگرافی پیشرفته، میلیون ها مولکول مختلف را در یک میلیمتر مخلوط براحتی شناسایی می‌کنند و پژوهشگران فناوری نانو می‌توانند به کمک این روشها قسمت عمده‌ای از مشکلات خود را در شناسایی مواد مورد استفاده رفع کنند.

کروماتوگرافی به عنوان یکی از روشهای آزمایشی کارآمد در نانو فناوری، شامل چند روش است: کروماتوگرافی کاغذی، کروماتوگرافی ژلی و کروماتوگرافی گازی از جمله روشهایی هستند که در اینجا با آنها آشنا می‌شویم. دقت کنید که زمان، عامل کنترل ما بر انتخاب ذراتی است که با سرعت های مختلف در محیط کروماتوگرافی توزیع مکانی می ‌‌یابند.




برچسب ها : مواد شیمیایی . کاربرد .مناتول HPLC.GC. مواد آلی. ترکیب شیمیایی .کروماتوگرافی. محصولات مرک . شارلو . پانراک . , کروماتوگرافی , مواد شیمیایی مرک , Scharlau - Scharlab , مواد شیمیایی , شارلو . شارلب , Merck KGaA ,
 

آخرین مطالب

» مواد شیمیایی و تجهیزات آزمایشگاهی ( یکشنبه 7 مرداد 1397 )
» Scharlau - Scharlab (شارلب , شارلو ) ( یکشنبه 3 مرداد 1395 )
» تولید کننده گیره مبرد ( بـورت ) روکش دار و گیره بالن پیچ آبی ، نوا دوبل (فلزی) ( شنبه 16 آبان 1394 )
» Merck ، Scharlau ، Sigma-Aldrich ، Panreac ، Riedel ، Applichem ،Fluka ، CDH ،SD Fine ( سه شنبه 8 اردیبهشت 1394 )
» قسمتی از مواد شیمیایی شارلو 2 ( دوشنبه 19 خرداد 1393 )
» قسمتی از مواد شیمیایی شارلو 1 ( سه شنبه 13 خرداد 1393 )
» حلالیت چست ( دوشنبه 22 اردیبهشت 1393 )
» تیترازول مرک . شارلو (محلول های استاندارد) ( جمعه 19 اردیبهشت 1393 )
» آشنایی و کاربرد با وسایل آزمایشگاهی ( پنجشنبه 10 بهمن 1392 )
» آشنایی با برخی معرفهای آزمایشگاهی ( جمعه 20 دی 1392 )
» کاربرد داروئی مواد شیمیایی ( دوشنبه 2 دی 1392 )
» زمینه های تجاری مرک ( سه شنبه 30 مهر 1392 )
» معرفی عناصر جدول مندلیف بریلیم . لیتیم .نیکل ( پنجشنبه 7 شهریور 1392 )
» معرفی عناصر جدول مندلیف :آرسنیک . سرب ( چهارشنبه 6 شهریور 1392 )
» معرفی عناصر جدول مندلیف : هیدروژن . هلیم ( شنبه 19 مرداد 1392 )